Εmbriologie (Assisting Hatching, IMSI, FISH, DNA Fragmentation, Endotest

Se compune din embriologi cu experiență, înalt calificați, cu cercetări intense și lucrări de scriere cu respect pentru particularitățile fiecărui cuplu, pentru furnizarea de servicii științifice de cel mai înalt nivel.

Laboratorul de embriologie de ultimă generație, datorită personalului său înalt instruit, are cele mai avansate sisteme de cultură a embrionilor, asigurând astfel rate de sarcină în mod constant ridicate și oferind cele mai bune medicamente moderne din acest domeniu.

În special, laboratorul are un sistem special pentru înregistrarea temperaturii, a CO2, a nivelurilor de pH în interiorul cuptoarelor de cultură a embrionilor, pentru a verifica continuu și în timp real funcționarea lină și neîntreruptă a tuturor mașinilor din laborator.În plus, laboratorul are un sistem special pentru înregistrarea continuă a temperaturii, umidității și a particulelor organice în laborator, asigurând astfel un mediu de calitate superioară pentru Fertilizarea in Vitro și cultura embrionilor. Aceste sisteme speciale de înregistrare ale laboratorului de embriologie sunt active 24 de ore pe zi, 7 zile pe săptămână și în zilele nelucrătoare sunt conectate la un sistem special de alertă, care notifică biologul de serviciu, despre orice problemă care ar putea apărea.

Ovulele congelate, embrionii și spermatozoizii sunt depozitați în recipiente cu azot lichid, în care au fost integrați detectoare speciale pentru înregistrarea continuă a temperaturii.

În plus, laboratorul de embriologie și centrul în ansamblu au un sistem de urmărire complet automatizat al tuturor materialelor și proceselor biologice ale pacienților noștri, un sistem de tehnologie de ultimă generație, Cosmos.

Laboratorul este responsabil de furnizarea de servicii excelente cuplului pentru toate cele mai recente și mai eficiente strategii de FIV, cum ar fi FIV convențional, vitrificare (congelare), microfertilizare (ICSI), transfer de embrioni, vitrificarea ovocitelor și embrionilor cu rate de supraviețuire excelente după dezghețarea, precum și un excelent, flexibil la nevoile și cerințele programului cuplu de donare de ovule și embrioni.

Tehnici avansate de reproducere asistata

Fiecare caz de infertilitate cu care ne confruntăm la IAKENTRO este special! Urmând această abordare, aplicăm o varietate de tehnici moderne – personalizate, pentru a crește rata de succes a fiecărui efort.

Eclozarea Asistata (Assisting Hatching)

Embrionii, în stadiile incipiente ale dezvoltării lor, sunt înconjurați de un capac exterior, zona transparentă, care protejează celulele embrionare. Dar apoi, în a 5-a-6-a zi a divizarii lor, când embrionul se află în uter, această zonă se descompune la un moment dat (eclozionare), astfel încât embrionul din interiorul acestuia să iasă implantat în endometru și să crească în continuare .

Cu toate acestea, în unele cazuri de fertilizare in vitro a embrionilor, se consideră necesar să se asiste la eclozare prin reducerea grosimii zonei transparente. Procedura se efectuează în ziua transferului embrionului și se face cu ajutorul unui laser special. Acest lucru crește semnificativ șansele de implantare a embrionului în uter.

Se recomandă eclozarea asistată a embrionilor înainte de transferul embrionilor in urmatoarele cazuri:

• La femeile de peste 37 de ani
• La embrioni crioconservați
• La femeile cu un răspuns „slab” la hormoni (poor responders)
• La femeile cu valori ale FSH mai mari decât media normala

Injectarea de spermă selectată morfologic în ovul (IMSI)

Selecția spermatozoizilor care urmează să fie utilizată pentru fertilizarea ovulelor de cuplu se bazează pe criteriile de morfologie și motilitate. Cu toate acestea, în unele cupluri această evaluare nu este suficientă. Mai precis, în cazuri precum infertilitatea masculină severă asociată cu morfologia probei slabă care are ca rezultat o rată de fertilizare scăzută sau embrioni de calitate scăzută în încercările și avorturile eșuate anterioare, se recomandă metoda de selectare morfologică a spermei chiar și a ovulelor următoare. Această metodă oferă un avantaj suplimentar față de microfertilizare (ICSI), deoarece permite o selecție mai detaliată a spermatozoizilor care se efectuează cu ajutorul unui microscop special de înaltă rezoluție. Cei mai buni spermatozoizi sunt selectați pe baza unor criterii morfologice specifice.   În acest fel, o morfologie mai bună a spermei este probabil asociată cu un potențial de creștere mai bun al embrionilor de calitate mai bună și, în cele din urmă, duce la o rată de sarcină potențial crescută.

Hibridizare fluorescentă a spermei (spermă FISH)

De multe ori, încercările eșuate de sarcină sau avorturile repetate pe care le întâmpină cuplul pot ascunde anomalii genetice sau cromozomiale găsite în sperma soțului. Aceste anomalii în timpul fertilizării ovulului și fuziunii nucleelor ​​sunt transmise, de asemenea, materialului genetic al embrionului, iar în cazurile de aneuploidie cromozomială severă, de exemplu, pot fi cauza avortului spontan.

Ce este și cum se aplică tehnica spermei

Proba de material seminal după evaluarea tuturor parametrilor (concentrație, motilitate, morfologie) este spălat și apoi fixat pentru a efectua tehnica. FISH folosește sonde fluorescente speciale care se leagă de regiunile ADN de pe cromozomi. În acest fel, sub forma fluorescenței detectoarelor, orice aneuploidii sunt detectate în cei 12 cromozomi examinați și rezultatul este înregistrat sub formă de procent.

Rezultatele tehnicii sunt destul de luminoase și pot dezvălui, de exemplu, un procent anormal de aneuploidie pe cromozomul Y, care poate fi asociat cu o anomalie a locurilor genetice care cauzează azoospermia la bărbați. Medicul evaluează rezultatele și, în funcție de procentul de aneuploidie și de cromozomul în care se află, va direcționa cuplul către metoda adecvată de fertilizare in vitro.

Test de fragmentare a ADN-ului spermatic

Studii recente au arătat că nivelurile crescute de fragmentare a ADN-ului spermatozoizilor, datorită stresului oxidativ ridicat, pot face ca un cuplu să nu creadă. Aceste studii arată că, în probele de spermă în care procentul de spermă cu leziuni ale ADN-ului este mai mare de 30%, șansa de a rămâne gravidă este semnificativ redusă.

Se recomandă testarea fragmentării ADN spermatic:

• La cuplurile cu mai mult de 3 încercări consecutive de FIV nereușite
• În cazurile de fertilizare in vitro în care dezvoltarea embrionului se oprește în primele zile după fertilizare
• În cazurile de avort spontan recurent
• În cazurile de infertilitate inexplicabilă

Examinarea nivelului de fragmentare a ADN-ului spermei nu este corelată cu parametrii examinați în diagrama spermei. Prin urmare, probele cu concentrație normală, motilitate și morfologia spermei pot avea rate crescute de fragmentare a ADN-ului și invers.

În caz de efect patologic, tratamentul recomandat bărbatului este administrarea de medicamente antioxidante pe o perioadă de cel puțin 90 de zile. Dacă nu există nicio îmbunătățire după tratament, poate fi necesară o biopsie testiculară sau o aspirație a spermei (TESE sau FNA) pentru a se asigura că ADN-ul spermei obținut este mai puțin deteriorat.

Cipuri inovatoare de sortare a spermei pentru a reduce fragmentarea ADN-ului spermei

S-a demonstrat că fragmentarea ADN-ului spermei este asociată cu rate reduse ale sarcinii, deoarece tehnicile de izolare și îmbogățire a spermatozoizilor cunoscute până în prezent nu au capacitatea de a izola acei spermatozoizi care au o rată scăzută de fragmentare a materialului genetic (fragment ADN).

Pentru a elimina restricția de mai sus, este oferită o nouă metodă de selectare și îmbogățire a spermei, dispozitivul de sortare a spermei.

Este un cip microfluidic de unică folosință, în care sperma funcțională este izolată direct din proba de spermă brută, oferind o populație îmbogățită de spermă normală prin îmbunătățirea tuturor parametrilor biologici, chiar și a fragmentării ADN-ului.

Acest cip innovator de sortare a spermei:

• Își bazează acțiunea pe microfluidici (microfluidici) imitând modul normal de ghidare a spermei către ovul, prin mucusul cervical, uter și trompele uterine. În cip, sperma normală și funcțională trece prin micropori, spre deosebire de sperma moartă sau mai puțin mobilă sau a celor cu anomalii morfologice.
• După screening, proba arată o morfologie și o mobilitate mai buna, o rată mai mică de fragmentare a ADN-ului și niveluri mai scăzute de ROS (radicali liberi de oxigen) comparativ cu proba originală.
• Elimină efectele nocive (creșterea ROS) ale metodelor convenționale de separare a spermei, fără a necesita pregătirea probei, prevenind riscul de infecție.
• Oferă proba finală în doar 30 de minute, reducând timpul de preparare.

ENDOTEST

Endotest este un test pentru a evalua susceptibilitatea endometrială în ziua transferului embrionar. O biopsie endometrială cu Pipelle se efectuează la aproximativ 7 zile după ovulație pentru a evalua nivelurile de expresie a biomarkerului atât în ​​celulele epiteliale cât și în celulele stromale.

Măsurarea expresiei acestora indică starea receptivă sau non-receptivă a endometrului pe baza intervalului normal evaluat al valorilor expresiei în controalele fertile. Biomarcatorii evaluați sunt receptorii totali de progesteron de tip B, factorul inhibitor al leucemiei (LIF) și receptorul LIF-R, genele HOXA-10 și HOXA-11 și integrinele avb3 atât în ​​epiteliu, cât și în celulele stromale. Apoi este posibil să se efectueze un tratament individualizat recomandând fie transferul embrionului în caz de endometru receptiv, fie îmbunătățirea mediului endometrial prin utilizarea progestogenilor, reevaluarea mediului endometrial și, în cele din urmă, transferul embrionului către un endometru receptiv.